Método: RT-PCR e Sequenciamento Automático de cDNA
Volume Lab.: 5,0 mL EDTA + 5,0 mL PPT
Rotina: 2ª 4ª e 6ª feira
Resultado: 15 dia(s)
Temperatura: Refrigerado
Coleta: - Coletar 1 tubo de sangue total-EDTA e 1 tubo de plasma-PPT, enviar refrigerado.
DOCUMENTO OBRIGATÓRIO:
Enviar o Questionário.
Sessão de downloads site Alvaro: REQ02032 - Questionário de genotipagem para o vírus HIV 1
Processamento da amostra coletada em PPT:
O material deve ser centrifugado logo após a coleta por 10 minutos a 1.100G* e enviado refrigerado. Enviar os tubos PPT sem manipulação, ou seja, no tubo primário.
Os materiais que chegarem em temperatura ambiente serão considerados como LIMITADOS para a quantificação e/ou detecção viral e a interpretação do resultado será restrito.
*3137 RPM (centrifuga com raio de 10cm)
*2480 RPM (centrifuga com raio de 16cm)
*2118 RPM (centrifuga com raio de 22cm)
Código SUS:
Código CBHPM: 4.03.14.14-6
Interpretação
A genotipagem (sequenciamento de DNA) é o método de escolha para a identificação de mutações nos genes da protease e da transcriptase reversa do HIV-1, podendo predizer um possível fracasso terapêutico e relacionando que drogas não devem ser utilizadas na terapia anti-retroviral. Os resultados são interpretados em associação a dados referentes a tratamentos prévios e outras informações clínicas e laboratoriais relevantes.
Sinônimos: Resistência a inibidores de protease e inibidores de transcriptase reversa; detecção de mutações associadas a resitência aos inibidores da protease e da RT.
Indicação: Pacientes infectados por HIV-1 que exibem fracasso àterapia anti-retroviral e apresentam níveis de RNA viral superiores a 1.000 cópias por mililitro de sangue. Amostras com valores inferiores podem apresentar quantidades insuficientes de cDNA para as reações de amplificação e sequenciamento nucleotídico. Heterogeneidade genética viral e inibidores endógenos também podem impedir a obtenção de resultados favoráveis. O paciente deve estar usando a medicação pois as mutações deixam de ser detectadas após a suspensão do medicamento.
Interpretação clínica: O teste é capaz de detectar mutações que estejam presentes em pelo menos 30% da população viral presente no paciente.
O resultado deve ser interpretado em conjunto com a história dos medicamentos usados pelo paciente. Quando uma droga é suspensa, as mutações que geram resistencia a ela podem diminuir proporcinalmente em relaçao ao virus selvagem, e por este motivo deixam de ser detectadas. As cepas resistentes permanecem no individuo porém em proporção menor que a sensibilidade do teste que é de 30%. A proporção da cepa resistente aumenta quando a droga é reintroduzida. Por este motivo o teste indica as drogas em que o paciente não vai responder (para as quais mutações foram detectadas) do que as drogas que ele vai responder.
Sugestão de leitura complementar:
Shafer RW. Genotypic testing for human immunodeficiency virus type 1 drug resistance Clinical Microbiology Reviews 2002; 15:247-77.